技術(shù)文章
當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章
10
一些細(xì)胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長,但相當(dāng)一部分哺乳動物細(xì)胞需要表面貼壁。因此,用于提供細(xì)胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無毒、無菌外,還需經(jīng)表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長。細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶體設(shè)計合理,表面TC處理,適用于實驗室中等規(guī)模細(xì)胞和組織培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是實驗室進(jìn)行長時間細(xì)胞培養(yǎng)、大量細(xì)胞擴增和防污染的合適培養(yǎng)器皿。未處理表面適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng);TC處理表面,經(jīng)過處理后聚苯乙烯表面具有較好親水性,適用于常見細(xì)胞系的粘附和伸展;超親水處理表面...
查看更多9
凋亡(Apoptosis),或者說程序性細(xì)胞死亡(Programmedcelldeath),是細(xì)胞內(nèi)建的防御機制之一,在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常,會導(dǎo)致多種疾病,包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法,從大框架上講,可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。然而,每一種方法都有其優(yōu)缺點,且并非所有的方法對每一位實驗人員來說都是實用的。細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是細(xì)胞程序性死亡(Programmedcelldeath)的...
查看更多8
原代培養(yǎng)的細(xì)胞,來源于胚胎、組織器官和外周血,通過特殊的分離方法制備,稱為原代細(xì)胞。初步分離得到的細(xì)胞具有與體內(nèi)細(xì)胞相似的生物學(xué)特性,是研究生進(jìn)行與物體相關(guān)的生命活動的理想材料。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)是從體內(nèi)取出人/小鼠模型動物特異性細(xì)胞,用胰蛋白酶和螯合劑(EDTA)處理,分散成單細(xì)胞,并在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使得細(xì)胞能夠存活、生長和繁殖的過程。原代培養(yǎng)是指細(xì)胞、組織和器官直接從體內(nèi)取出后立即進(jìn)行培養(yǎng)。此時的細(xì)胞保持了原細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,則仍保留二倍體數(shù)。但實際上,...
查看更多9
成纖維細(xì)胞比心肌細(xì)胞更容易貼壁,具有分裂增殖能力。差異貼壁后,原代心肌細(xì)胞間中仍有少數(shù)成纖維細(xì)胞混雜,如果處理不當(dāng),很容易長成優(yōu)勢細(xì)胞。溴脫氧尿苷(BrdU)可以干擾細(xì)胞有絲分裂,因此BrdU常規(guī)用于抑制成纖維細(xì)胞的生長。但如果用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,由于胎牛血清含有很多促有絲分裂因子,BrdU很難抑制成纖維細(xì)胞的生長。使用小牛血清可以克服這種現(xiàn)象,獲得90%以上的心肌細(xì)胞。觀察原代心肌細(xì)胞間形態(tài)時,接種密度低,貼壁心肌細(xì)胞數(shù)量減少。為了防止存活的心肌細(xì)胞隨著液體的更換而被丟棄,...
查看更多12
細(xì)胞外泌體是細(xì)胞分泌的大小約為30-150nm的納米物質(zhì),是細(xì)胞外囊泡的一類,結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞,磷脂雙分子層表面具有多種特異性膜蛋白,內(nèi)部搭載著多種蛋白質(zhì)、RNA、DNA等重要生物信號物質(zhì),廣泛分布于血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、膽汁等各種體液中。外泌體的來源細(xì)胞種類非常豐富,幾乎在人體血液、尿液、母乳和唾液等多種體液中都能發(fā)現(xiàn)它的蹤跡??蓚鬟f包括DNA、RNA、miRNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在內(nèi)的多種生物活性物質(zhì),同時保護包裹的內(nèi)含物免受核酸酶和蛋白酶,以及外界壞境變化引起的降解...
查看更多19
CellCountingKit-8(簡稱CCK-8)試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比較方法優(yōu)點缺點CCK-8法靈敏度高、不使用有機溶劑、檢測迅速、重復(fù)性好價格較MTT貴、CCK8試劑的顏色為淡紅色、與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,容易漏加或多加MTT法價格便宜操作步驟較多,需要使用有機試劑,靈敏度不如CCK-8,多數(shù)需要配制,檢測時間長,細(xì)胞毒性較高一、原理:CCK-8是MTT的升級產(chǎn)品,其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧...
查看更多14
一、材料與儀器:大鼠、裂解緩沖液、濃蔗糖溶液、超速離心機、組織研磨器二、實驗步驟:1.配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液(PMSF在使用前添加),冰上放置。裂解緩沖液:①0.25mol/L蔗糖網(wǎng)織紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(RSB)②0.25mol/L蔗糖(超級純)③10mmol/Tris-HCl(pH7.4)④10mmol/LNaCl⑤3mmol/LMgCl2⑥1mmol/LDTT⑦0.5mmol/LPMSF(用前從溶于乙醇的100mmol/L貯存液中添加)濃蔗糖溶液:①2mol/L蔗糖RS...
查看更多9
材料與儀器:細(xì)胞、TBS抽提緩沖液、離心管實驗步驟:步驟1:根據(jù)樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟1進(jìn)行操作。(1)細(xì)胞樣品①單層培養(yǎng)的細(xì)胞以用冰預(yù)冷的TBS將單層細(xì)胞洗滌2次,用刮棒把細(xì)胞刮入約0.5ml的TBS中,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到冰浴的離心管中,用1mlTBS沖洗培養(yǎng)皿,并入離心管中的細(xì)胞懸液。于4℃以1500g離心10分鐘以收獲細(xì)胞。用5~10倍體積經(jīng)冰預(yù)冷的TBS重懸細(xì)胞并再度離心。用TE(pH8.0)重懸細(xì)胞,使細(xì)胞密度為5x107細(xì)胞/ml,轉(zhuǎn)移至一個三角燒瓶中...
查看更多聯(lián)系地址
上海市徐匯區(qū)銀都路466號聚科生物園1號樓303室聯(lián)系郵箱
kunmsales006@163.com聯(lián)系電話
021-51216810聯(lián)系QQ
550138389版權(quán)所有©2025 上海昆盟生物科技有限公司 備案號:滬ICP備19032849號-2
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 sitemap.xml